遊戲角色大致分為兩大陣營，分別為好人陣營及狼人陣營。
基本角色[]
狼人殺的基本遊戲角色主要建基於米勒山谷狼人遊戲角色並加以更動。隨着遊戲的發展，狼人殺加入越來越多的遊戲角色，使遊戲更為有趣。
角色
技能
警長
警長角色會在首夜公佈前一夜死訊前進行競選，參與競選的玩家輪流發言，再由沒有競選警長的玩家投票選出警長。警長可以在往後的白天安排發言順序，並獲得歸票權利。放逐公投中，警長的投票視為1.5票（部分版本作2票）。警長以任何方式被淘汰均可以選擇移交或撕毀警徽。
好人陣營
平民
又稱「村民」。沒有特殊技能，黑夜階段全程閉眼，透過白天階段所得資訊投票放逐疑似狼人的玩家。
預言家
每夜可以查驗一位存活玩家的所屬陣營，並在白天透過發言向好人報出資訊。
女巫
擁有一瓶解藥和一瓶毒藥。解藥未使用時可以得知狼人的殺害對象，並決定是否救這一位玩家。然而，解藥全程不能用於解救自己。女巫也可以利用白天所得資訊，將懷疑的對象毒殺，該對象死後不能發動技能。解藥和毒藥不可以在同一夜使用。
獵人
除殉情或被毒殺外，以任何其他方式被淘汰時可以公布角色牌發動技能開槍帶走一位玩家，亦可以選擇壓槍不發動技能。
白痴
若白天放逐公投中被投出，可翻開角色牌以免疫該次放逐，但在之後的放逐公投中失去投票權利。狼人無須追刀白痴。
狼人陣營
狼人
黑夜可以睜眼與隊友見面並討論戰術與選擇殺害對象。狼人可以選擇當夜不殺害任何玩家（空刀）或自殺（自刀）。白天混入村落中混淆好人。狼人可以在白天任何時候選擇公布角色牌自我淘汰（自爆）強制進入黑夜階段，並在黑夜階段結束時離場。
進階角色[]
主條目：好人陣營、狼人陣營、第三方陣營、中立陣營